ไมลส์ มอราลเลส ตัวเอกแห่งจักรวาลแมงมุมผิวสี ได้ผจญกับเรื่องราวที่แสนจะสนุกสนานอีกครั้ง โดยในคราวนี้เข้าไปหลุดเข้าไปในมิติแมงมุมอีกที่หนึ่ง ที่เขาได้พบกับเหล่าตัวแปรที่เป็นสไปเดอร์แมนเหมือนกัน ซึ่งในรอบนี้ฮีโร่ไม่ได้ร่วมมือกันอย่างดีเหมือนเคย แต่กลับมีความขัดแย้งกันเอง ไมลส์ ต้องเรียนรู้ให้ได้ว่าฮีโร่ที่เขาอยากจะเป็นนั้น เป็นคนอย่างไรและเขาต้องจับมือกับเกว็นผ่านเรื่องร้ายๆในคราวนี้และกลับไปยังบ้านของตนให้จงได้